隨著分子生物學(xué)研究逐步普及,全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)在國(guó)內(nèi)的需求在不斷增長(zhǎng)不管是什么用途,凝膠成像系統(tǒng)的組件都是相似的。都有一個(gè)拍攝系統(tǒng)、一個(gè)帶有特殊光源的暗箱與獲取和分析凝膠圖片的軟件組成。”但是,大部分凝膠成像系統(tǒng)提供了不同的產(chǎn)品特性來(lái)滿(mǎn)足不同科學(xué)研究的需要??焖侔l(fā)展的電子技術(shù)、光學(xué)技術(shù)和成像分析軟件使成像操作越趨人性化。下面我們對(duì)全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)的各種光源及其用途做簡(jiǎn)要介紹:
1、雙側(cè)反射白光光源,也是我們使用zui多的光源,通常作為系統(tǒng)照明光源使用,即放置或調(diào)整DNA膠或蛋白膠位置,或在對(duì)鏡頭調(diào)整聚焦時(shí)使用,當(dāng)然在對(duì)非透明材質(zhì)的蛋白膠或其他成像物質(zhì)進(jìn)行成像時(shí)也需開(kāi)啟反射白光。
2、透射白光,即通常所說(shuō)白光板,主要用于蛋白質(zhì)膠拍攝時(shí)使用,因?yàn)榘坠獍逦挥谕干渥贤鉄粝渖戏?,所以為不影響透射紫外光源的使用,同時(shí)也更節(jié)約室內(nèi)空間,白光板一般可以折疊豎立在箱體后部。
3、全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)透射紫外光源,即紫外透射燈箱,主要用于DNA膠拍攝,由于DNA常用的熒光染料是EB,而用標(biāo)準(zhǔn)302nm 紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號(hào),可用帶CCD成像頭的凝膠成像系統(tǒng)拍攝到,所以透射紫外的波長(zhǎng)通常是305nm段。
4、目前,許多廠家設(shè)計(jì)了雙波長(zhǎng)的透射紫外燈管(302nm、365nm),其365nm光源主要適用于制備觀察以及切割條帶,減少對(duì)DNA的破壞,并減小對(duì)人的傷害。
5、全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)紫外反射燈源,一般為選配件,主要原因是其使用并不廣泛,只是在非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像才需要使用。往往比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠,透射光源*可以滿(mǎn)足,所以大部分廠家都只將紫外反射光源作為選配,只是在儀器上預(yù)留了位置與接口。
6、還有需要指出的是抽拉式托盤(pán)的使用,由于化學(xué)發(fā)光成像無(wú)需任何光源,屬自發(fā)光成像,但由于化學(xué)發(fā)光的信號(hào)比較微弱,不穩(wěn)定,同時(shí)化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)的鏡頭往往是手動(dòng)聚焦,所以需要一個(gè)高度可調(diào)的托盤(pán)專(zhuān)門(mén)供化學(xué)發(fā)光成像使用。
7、除此之外,提到全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)的三色LED燈光源是3個(gè)高光強(qiáng)反射激發(fā)器(475納米,、534納米、632納米),為多色熒光成像系統(tǒng)的比不可少的組成部分。Fluorchem HD2 的DE-500暗箱還預(yù)留連續(xù)波長(zhǎng)光源光纖接口,以便于將來(lái)擴(kuò)展至連續(xù)波長(zhǎng)光源(激發(fā)光的波長(zhǎng)范圍400-750nm),涵蓋了一些需要特殊激發(fā)光的熒光,多應(yīng)用于多色熒光(Cy3/Cy5)和活體成像。
全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)采用技術(shù)的紫外和白光傳輸,因此傳輸光源更均勻分布的光,zui大限度地消除了光密度不均所造成的影響的結(jié)果。 圖像分析系統(tǒng)的基礎(chǔ)是質(zhì)量,未知樣品的立場(chǎng)的基礎(chǔ)上的地圖可作定性分析,我們可以判斷的組成和性質(zhì)的。